Emaitzak: 5
| 2019 | ||
| Aldiz, CRISPR/ Cas9 bidez eraldatutako zeluletan 500 base parekoproduktu (banda) bat ikusi genuen. Honek esan nahi du | sortutako lerro zelularrak, kopietakobatean behintzat, puromizina genea txertatuta daukala E2F2 genearen baitan. Modu paraleloanbeste PCR bat burutu genuen (PCR E2F2, 4B Irudia), lehen diseinatutako aurreranzko haslea, E2F2 genearen 2 introia ezagutuko duen atzeranzko hasle batekin konbinatuz. | |
| Nukleotido bakarraren txertaketa denez, honek irakurtarauaren aldaketa eta STOP kodoi goiztiar baten agerpena ekarriko du. Beraz, | sortutako lerro zelularra E2F2rako KO homozigotoa dela ondoriozta dezakegu, kopietako bateanPuroR genea eta bestean indela aurkezten dituelarik (E2F2Puro/ Indel genotipoa). | |
| A.Puromizina kasetearen integrazioa gertatu dela egiaztatzeko E2F2rako aurreranzko (Fwd) eta puromizinarako atzeranzko (Rev) hasle bikote bat diseinatu (E2F2Fwd/ PuroRev), eta PCR erreakzio bat burutu zen zelula basatien (WT) etabalioztatu beharreko lerro zelularraren (E2F2 KO?) DNA genomikoarekin. WTzeluletan anplifikaziorik behatu ez zen bitartean, | sortutako lerro zelularrean 500base pareko (bp) banda ikusi zen, puromizinaren txertaketa egiaztatuz. B. DNAgenomiko berberak hartuta, beste PCR bat burutu zen aurreranzko (Fwd) hasleberdina eta E2F2rako atzeranzko (Rev) hasle bat erabilita (E2F2Fwd/ E2F2Rev). | |
| C. Azkeneko biPCR produktuen nukleotido segida ezagutzeko Sanger sekuentziazioa burutugenuen. WT zelulen DNArekin konparatuta, | sortutako lerro zelularreko kopietakobatean puromizinaren txertaketa (P2A Puro Cassette), eta bestean nukleotidobateko txertaketa (1 bp ins) gertatu direla ikus dezakegu. | |
| Lan honetan, CRIPSR/ Cas9n oinarritutako metodo bat erabiliz, E2F2 generako zelula KOak modu oso efizientean sortzea lortu dugu. Gainera, CRISPR/ Cas9metodoaren bidez edizio genikoa burutzeko baldintzak optimizatu ditugu, hala nola, gRNAdiseinatzeko programa bioinformatiko egokia bilatuz, zelula eraldatuen hautespena aurreraeramateko modu eraginkorra finkatuz eta | sortutako lerro zelularra balioztatzeko tekniketako bataurkeztuz. Optimizatutako protokoloarekin, laborategian edozein genetarako lerro zelular KOakCRISPR/ Cas9 teknikaren bidez eratzeko estrategia martxan jartzea lortu dugu. | |
Emaitza gehiago eskuratzen...
Loading...
Aldaerak
| sortu | 5 (0,03) |
Lehen forma
| sortutako | 5 (0,03) |
Argitaratzailea
| UEU | 5 (0,03) |
Konbinazioak (2 lema)
| sortu lerro | 5 (0,03) |
Konbinazioak (3 lema)
| sortu lerro zelular | 5 (0,03) |
Urtea
Bilaketarako laguntza: adibideak
| Oinarrizko galderak | |
|---|---|
| katu | "katu" lema duten agerpen guztiak bilatu |
| !katuaren | "katuaren" formaren agerpenak bilatu |
| katu* | "katu" hasiera duten lema guztiak bilatzen ditu |
| !katu* | "katu" hasiera duten forma guztiak bilatzen ditu |
| *ganatu | "ganatu" bukaera duten lema guztiak bilatzen ditu |
| !*ganatu | "ganatu" bukaera duten forma guztiak bilatzen ditu |
| katu + handi | "katu" eta "handi" lemak jarraian bilatu |
| katu + !handia | "katu" lema eta "handia" forma jarraian bilatu |
| Distantziak | |
| katu +3 handi | "katu" eta "handi" lemak 3 elementuetako distantzian bilatu |
| katu +2 !handia | "katu" lema eta "handia" forma 2 elementuetako distantzian bilatu |
| katu +2 !handi* | "katu" lema eta "handi"z hasten diren formak 2 elementuetako distantzian bilatu |
| Formen konbinazioa desberdinak | |
| bero + handi | asko | "bero" lema eta jarraian "handi" edo "asko" lemak bilatu |
| bero +2 !handi* | !asko* | "bero" lema eta jarraian "handi"z edo "asko"z hasten diren formak |
| !bero + handi|asko|gutxi|txiki | "bero" forma eta jarraian "handi", "asko", "gutxi", "txiki" lemak |
| Ezaugarri morfologikoekin | |
| proba + m:adj | "proba" lema eta jarraian adjketibo bat |
| proba +2 m:adj | "proba" lema eta bi hitzetako distantziak adjektibo bat adjketibo bat |
| bero + handi|asko + m:adi | "bero" lema jarraian "handi" edo "asko" eta jarraian aditz bat |
| proba + m:izearr-erg | "proba" lema eta ergatibo kasuan dagoen izen arrunta |
Ezaugarri morfologikoak
KATEGORIA
| adb | adberbioa |
|---|---|
| adi | aditza |
| adilok | aditz-lokuzioa |
| adj | adjektiboa |
| det | determinatzailea |
| ior | izenordaina |
| izearr | izen arrunta |
| izepib | pertsona-izena |
| izelib | leku-izena |
| izeizb | erakunde-izena |
| lbt | laburtzapena |
| lotjnt | juntagailua |
| lotlok | lokailua |
| esr | esaera |
| esk | esklamazioa |
| prt | partikula |
| ono | onomatopeia |
| tit | titulua |
KASUA
| abs | absolutiboa |
|---|---|
| abl | ablatiboa |
| ala | adlatiboa |
| ban | banatzailea |
| dat | datiboa |
| des | destinatiboa |
| erg | ergatiboa |
| abz | hurbiltze-adlatiboa |
| ine | inesiboa |
| ins | instrumentala |
| gel | leku-genitiboa |
| mot | motibatiboa |
| abu | muga-adlatiboa |
| par | partitiboa |
| psp | postposizioa |
| pro | prolatiboa |
| soz | soziatiboa |
MUGATASUNA/NUMEROA
| mg | mugagabea |
|---|---|
| ms | mugatu singularra |
| mp | mugatu plurala |
| mph | mugatu plural hurbila |
ADITZ MOTA
| da | da |
|---|---|
| du | du |
| dio | dio |
| zaio | zaio |
| da-du | da-du |
| du-zaio | du-zaio |
| dio-zaio | dio-zaio |
| da-zaio | da-zaio |
| du-dio | du-dio |
| da-zaio-du | da-zaio-du |
| da-zaio-du-dio | da-zaio-du-dio |