|
2001
|
|
|
Hik badakin denborak, denboraren gatibu den denborak, osatzen duela musika latzena. Hortaz kontura hadi garai batean maitasun fruitu hezeak izan ziren ezpainak, erabat zartaturik eta agorturik erakusten ditunala eta adinak
|
sortutako
lerro, marra paraleloan artetik, izkutatua dunan zera hori... hire ahoa dunala. Begira nazan, eta ohartu hadi burugogortasunak bultzatzen haunala hire memoriaren pantailan kiskalitako gomutak proiektatzera.
|
|
2008
|
|
|
Ogi xerra xigortu bi gurinaz igurtzi ondoren, kafea atera zuen kikarara. Lurrunak
|
sortutako
lerro zurixka jolasti hura arnastu zuen lehen da bizi eta, ondoren, lehen zurrutean, poztasunezko has pe ren luzea utzi zuen ezpainetatik irteten.
|
|
2015
|
|
|
Zorion Ustelan pisu handia zuten euskara eta literaturaren inguruko hausnarketek, baina Mermelada Ustelan ia testu guztiak sormenezko eta fikziozkoak ditugu. Horregatik, alea salbuespentzat jo daiteke Saizarbitoriaz geroztik
|
sortutako
lerro soziologikoagoan edo (batez ere Oh! Euzkadin).
|
|
2019
|
|
|
Aldiz, CRISPR/ Cas9 bidez eraldatutako zeluletan 500 base parekoproduktu (banda) bat ikusi genuen. Honek esan nahi du
|
sortutako
lerro zelularrak, kopietakobatean behintzat, puromizina genea txertatuta daukala E2F2 genearen baitan. Modu paraleloanbeste PCR bat burutu genuen (PCR E2F2, 4B Irudia), lehen diseinatutako aurreranzko haslea, E2F2 genearen 2 introia ezagutuko duen atzeranzko hasle batekin konbinatuz.
|
|
|
Nukleotido bakarraren txertaketa denez, honek irakurtarauaren aldaketa eta STOP kodoi goiztiar baten agerpena ekarriko du. Beraz,
|
sortutako
lerro zelularra E2F2rako KO homozigotoa dela ondoriozta dezakegu, kopietako bateanPuroR genea eta bestean indela aurkezten dituelarik (E2F2Puro/ Indel genotipoa).
|
|
|
A.Puromizina kasetearen integrazioa gertatu dela egiaztatzeko E2F2rako aurreranzko (Fwd) eta puromizinarako atzeranzko (Rev) hasle bikote bat diseinatu (E2F2Fwd/ PuroRev), eta PCR erreakzio bat burutu zen zelula basatien (WT) etabalioztatu beharreko lerro zelularraren (E2F2 KO?) DNA genomikoarekin. WTzeluletan anplifikaziorik behatu ez zen bitartean,
|
sortutako
lerro zelularrean 500base pareko (bp) banda ikusi zen, puromizinaren txertaketa egiaztatuz. B. DNAgenomiko berberak hartuta, beste PCR bat burutu zen aurreranzko (Fwd) hasleberdina eta E2F2rako atzeranzko (Rev) hasle bat erabilita (E2F2Fwd/ E2F2Rev).
|
|
|
B. DNAgenomiko berberak hartuta, beste PCR bat burutu zen aurreranzko (Fwd) hasleberdina eta E2F2rako atzeranzko (Rev) hasle bat erabilita (E2F2Fwd/ E2F2Rev). WTzeluletan 700 bp ko produktua behatu zen bitartean,
|
sortutako
lerro zelularreanproduktu honetaz aparte, 1500 bp inguruko beste bat ikusi genuen. C. Azkeneko biPCR produktuen nukleotido segida ezagutzeko Sanger sekuentziazioa burutugenuen.
|
|
|
C. Azkeneko biPCR produktuen nukleotido segida ezagutzeko Sanger sekuentziazioa burutugenuen. WT zelulen DNArekin konparatuta,
|
sortutako
lerro zelularreko kopietakobatean puromizinaren txertaketa (P2A Puro Cassette), eta bestean nukleotidobateko txertaketa (1 bp ins) gertatu direla ikus dezakegu.
|
|
|
Lan honetan, CRIPSR/ Cas9n oinarritutako metodo bat erabiliz, E2F2 generako zelula KOak modu oso efizientean sortzea lortu dugu. Gainera, CRISPR/ Cas9metodoaren bidez edizio genikoa burutzeko baldintzak optimizatu ditugu, hala nola, gRNAdiseinatzeko programa bioinformatiko egokia bilatuz, zelula eraldatuen hautespena aurreraeramateko modu eraginkorra finkatuz eta
|
sortutako
lerro zelularra balioztatzeko tekniketako bataurkeztuz. Optimizatutako protokoloarekin, laborategian edozein genetarako lerro zelular KOakCRISPR/ Cas9 teknikaren bidez eratzeko estrategia martxan jartzea lortu dugu.
|
|
2021
|
|
|
Haren askatzeak eleak eta beleak altxatu zituen hedabide askotan. Gaur egunean ere, aktiboa da
|
Sortu
lerro politikoaren ondoan.
|
|
2022
|
|
|
Bere azken kongresuaren atarian, zerbait aldatzen ari dela
|
Sorturen
lerroetan nabari da. Arkaitz Rodriguez koordinatzaileak aitortu du" azken hamar urteetan erakutsi dugu aldaketa nabarmena egon dela gure estrategian".
|
|
2023
|
|
|
Inbertsio hau bideratzeko Udala" lagungarri izan daitezkeen dirulaguntzak eskuratzen saiatuko da: " esaterako, Europako Batasunak baditu horretarako propio
|
sortutako
lerroak, Next funtsen bidez".
|